大流量28.3L浮游菌悬浮颗粒计数器作业流程包含什么？

大流量28.3L浮游菌悬浮颗粒计数器的作业流程，核心是采样前灭菌、等速采样、规范培养三大环节，依据 GB/T 16293 标准及 GMP 规范执行。

一、采样前准备与灭菌

环境确认：检查洁净室温湿度是否在仪器适用范围内，关闭门窗，减少人员走动。采样点应均匀布置，离地0.8~1.5m（呼吸带高度），避开风口和人员频繁通道。

培养皿准备：使用Φ90mm无菌平皿，细菌选用胰酪大豆胨琼脂培养基（TSA），真菌选用沙氏葡萄糖琼脂培养基（SDA）。检查培养基无破损、无污染，室温平衡后使用。

仪器灭菌：用浸湿75%乙醇的脱脂棉擦拭采样口、采样管、转盘及罩子内外表面。消毒后先不放培养皿，启动仪器空转不少于5分钟，使残余消毒剂蒸发。

二、参数设置与采样

流量校准：确认采样流量稳定在28.3L/min±5%（即26.8~30.3L/min）。流量偏差会直接影响采集效率，导致结果失准。

采样量设定：根据洁净级别确定最小采样量。ISO 5级、B级（静态）最小采样量1000升/次，按28.3L/min流量需采满约35分钟；C/D级可采100L，约3.5分钟。

培养皿放置：用“五指抓拿"培养皿外径，轻拿轻放，避免人为污染。放入转盘后盖上盖子，确保密封良好。

采样操作：将采样口置于采样点，启动采样器。对于单向流洁净室，采样口应正对气流方向。采样过程中操作人员应远离采样口下风侧，不交谈、少走动。

三、培养与菌落计数

阴性对照：取同批次培养皿作为阴性对照，同法操作但不暴露采样，培养后应无菌生长，否则本次数据无效。

培养程序：采样后将培养皿倒置于培养箱中。细菌在30~35℃培养48小时；真菌在22~26℃培养3~5天。

计数与计算：肉眼直接计数或用菌落计数器点计。浮游菌浓度计算公式为：CFU/m³ = 平皿菌落数 × 1000 / 采样体积（L）。

四、关键注意事项

等速采样：采样口风速应与洁净室内风速基本一致，这是确保采集代表性的前提。

流量监控：采样过程中注意观察流量计，若流量波动超过±5%，应立即停止采样，检查管路密封性或滤芯是否堵塞。

灭菌：采样器清洁灭菌不充分，残留细菌脱落飞扬，可能使测定结果出现巨大误差。

规范执行上述流程，是确保大流量浮游菌采样数据准确可靠、符合洁净区微生物监测要求的基础。